”九“经考验，硕果为证：恩泽康泰外泌体工具频频亮相CELL等顶刊研究

一、ExoCCMⓇ 无外泌体血清试剂盒引用文章

收录 1  篇文章  |  最高IF: 12.5

1                (流体和空间)双限制工程提升 Cas12a 效率助力精准的基于单个外泌体的乳腺癌诊断

摘要

CRISPR/Cas系统在分子诊断领域具有巨大的应用前景。然而，Cas核酸酶与底物的自由扩散和随机碰撞降低了催化效率，阻碍了CRISPR诊断应用。本研究开发了一种流体和空间双重限域的Cas12a报告系统（FASTER），通过模块化核心增加CRISPR组分的局部密度，实现了单个肿瘤来源外泌体的精确识别。FASTER可灵敏检测单个外泌体，检测限达10个颗粒/微升。结合LDA分析，FASTER对乳腺癌的诊断准确率超过90%。

二、ExosupurⓇ外泌体纯化试剂盒引用文章

收录 17  篇文章  |  最高IF: 45.1  (Cell)

本期盘点的ExosupurⓇ外泌体纯化试剂盒引用文章，除了应用与组织、单细胞解离上清、细胞上清、血浆等常见样本的外泌体分离之外，还涉及0.2ml微量血浆、富血小板血浆、精浆、类器官培养上清、组织、菌液、植物叶片、乳汁等外泌体的分离。另外，继2025年恩泽康泰助力客户文章发表在顶刊Nature（IF=50.5）后，今年又迎来了CELL顶刊（IF=42.5）的强大背书。

1                利用肌肉组织来源富含线粒体的EVs（Ti-mitoEVs）促进线粒体生物发生以推动再生医学的发展

摘要

线粒体损伤是多种组织损伤中的关键病理因素，亟需具有高生物安全性的特异性疗法。受细胞外囊泡在调节线粒体代谢中的天然作用启发，研究发现健康组织来源的富含线粒体的细胞外囊泡（Ti-mitoEV）能够促进线粒体生物发生，用于再生医学。本研究利用一种优化的方法从肌肉中高效分离含有丰富功能性线粒体的Ti-mitoEV。体外实验表明，Ti-mitoEV处理可增加受体细胞的线粒体生物发生并减少线粒体损伤，这些效应至少部分是通过线粒体基因组转移实现的。体内实验显示，Ti-mitoEV通过挽救线粒体损伤及其相关炎症，减轻了多种类型的组织损伤（如肌肉和肾脏）。作为天然纳米囊泡，mitoEV可以通过与其他工程方法整合进一步提升治疗效能。研究强调了Ti-mitoEV在促进线粒体生物发生中的重要作用，将其定位为治疗以线粒体损伤为特征的各种组织损伤的潜在疗法。

2                一种具有器官顺应性、褶皱结构的生物电子贴片用于精确的细胞内递送

摘要

将药物精准有效地送达器官的特定部位对于有效治疗疾病至关重要。然而，由于缺乏适当的机械和/或材料特性，传统的设备在实现临床所需的贴合性、空间可控性和效率方面面临着巨大挑战，尤其是对于复杂解剖结构的器时。在此，报告了一种用于器官贴合、折纸结构电转染（POCKET）的生物电子贴片，它通过参数化定制实现了高贴合性，理论上实现了在目标器官上的最大有效覆盖面积。四层的POCKET在组织-设备界面形成了独特的纳米孔-细胞并列结构，这能够诱导精确、均匀的电穿孔，同时加快载荷的细胞内运输。高效的输送效率和精确的空间可控性已通过各种器官进行了系统验证。POCKET介导的治疗输送实现了器官免受DNA损伤积累或缺血再灌注损伤的影响，恢复了器官的功能。这项研究提出了一种可定制的技术，具有推广价值，能够用于对复杂器官进行精准治疗。

3                三叶青通过sEV介导的星形胶质细胞-小胶质细胞间通讯抑制HSPB1 Akt NF-κB信号传导缓解热性惊厥

摘要

高热诱导的热性惊厥通常伴随炎症反应，但热量如何引发炎症反应尚不清楚。本研究发现，包含36种成分的三叶青总黄酮（FTH）预处理能够抑制大鼠的热性惊厥。单细胞转录组数据联合组织外泌体mRNA和蛋白数据发现，与炎症相关的小胶质细胞E亚群在热性惊厥模型组中富集，并与热反应及MAPK信号通路相关。热性惊厥后小胶质细胞和星形胶质细胞是Hspb1基因表达显著升高的两个最主要细胞群。此外，模型组中Hspb1表达升高且MAPK通路被激活。通过Transwell共培养实验，发现星形胶质细胞可能通过促进外泌体的释放来刺激小胶质细胞中HSPB1蛋白的高表达。FTH预处理可逆转海马HSPB1、Akt和NF-κB信号分子的激活。体内外实验表明，儿茶素可能是FTH抗热性惊厥的主要活性成分之一。研究揭示了FTH可能通过抑制由星形胶质细胞向小胶质细胞释放的细胞外小囊泡所触发的海马HSPB1/Akt/NF-κB信号通路，从而减轻热性惊厥。

4                人间充质干细胞来源的小细胞外囊泡特异性标记物的鉴定

摘要

人类间充质干细胞来源的细胞外小囊泡（MSC-sEVs）已展现出显著的免疫调节和促再生潜力。然而，由于缺乏明确的特异性标志物来定义MSC-sEVs，给其临床应用带来了重大挑战。在此，对三种细胞来源（脂肪来源、脐带来源和诱导多能干细胞来源）的MSC-sEVs蛋白质组学数据进行了同步分析，并选择了在MSC-sEVs中丰度较高的几种常见表面抗原作为候选标志物。免疫荧光结果显示，三种MSC的sEVs中CD13、CD29和CD90的阳性率均超过60%，而其他候选标志物的阳性率通常较低。高阳性率蛋白在通过其他方法纯化的MSC-sEVs中得到了进一步验证。此外，高分辨率显微镜作为一种互补方法，直观地验证了它们在MSC-sEVs中大量存在。同时，在其他非MSC-sEVs中，同时显示CD13、CD29和CD90的阳性率均未超过40%，这表明该标志物组合（三个标志物的阳性率阈值均为50%）能够特异性地区分MSC-sEVs与非MSC-sEVs。最后，对MSC-sEVs在连续传代过程中该标志物组合的阳性率进行了评估。研究结果表明，随着间充质干细胞传代次数的增加，其分泌的外泌体中CD29和CD90的阳性率逐渐降低，同时这些外泌体的促增殖活性也有所下降。总之，确定了一个特定且可量化的MSC-sEVs特征检测标志物组合，有助于开发标准化的检测方法来定义MSC-sEVs，并最终加速MSC-sEVs的临床转化。

5                血小板生物工程化的人诱导多能干细胞EV在临床前窦房结功能障碍模型中实现对纤维化窦房结的靶向修复

摘要

窦房结功能障碍是老年人群中常见的心律失常，其特征表现为纤维化和起搏器功能丧失，因此需要进行起搏器植入。但目前的治疗方法无法逆转其潜在的病理。源自人类诱导多能干细胞的细胞外小囊泡具有再生潜力，但缺乏靶向递送能力。在此，设计了由血小板膜融合而成的囊泡，这些囊泡能够协同结合缺血性损伤和免疫逃逸机制中的胶原蛋白。在窦房结功能障碍的实验鼠模型中，改造后的囊泡在窦房结中的积累量比未改造的囊泡高出3.1倍，纤维化程度降低63%，显著恢复心率和内在起搏器功能。这些囊泡能够抑制成纤维细胞的活化，并保护心肌细胞免受氧化应激的损害。因此，本研究建立了一个具有靶向性的、无需细胞参与的纳米治疗平台，可用于解决窦房结疾病中的纤维化和电生理功能障碍问题。

6          来源于细胞外囊泡的VDAC1蛋白通过自噬和线粒体自噬促进胃癌对紫杉醇的耐药性

摘要

紫杉醇（PTX）是用于治疗晚期胃癌（GC）的常规二线治疗药物，但由于患者化疗耐药性的出现，其临床疗效受到影响，耐药机制也尚不清楚。本研究旨在探究靶向外泌体蛋白治疗在逆转GC细胞PTX耐药中的潜力，并阐明所涉及的潜在分子途径。首先EV蛋白组学发现，PTX耐药的胃癌细胞来源的EV中VDAC1表达显著上调。功能研究发现，EV VDAC1在细胞间的转移使药物敏感的癌细胞产生了耐药性。进一步的GSEA分析和ATP功能测定表明，VDAC1介导的化疗耐药性与AMPK信号通路的激活以及mTOR通路的靶蛋白抑制相关。体内实验证实，EV VDAC1显著降低了胃癌肿瘤对PTX的敏感性。此外，DIDS抑制了EV VDAC1蛋白的表达，从而减少了对PTX的耐药性。免疫组织化学分析显示，与PTX敏感的患者相比，PTX耐药的胃癌患者中VDAC1的表达显著更高。研究结果强调了EV来源的VDAC1通过由AMPK/mTOR信号通路介导的自噬和线粒体自噬的双重调控在胃癌的化疗耐药性中的关键作用。针对EV来源的VDAC1的治疗策略已逐渐成为对抗化疗耐药性的一种有前景的治疗策略，为改善胃癌治疗效果开辟了新的途径。

7                肠上皮细胞外泌体在肠-肝芯片模型中促进肝祖细胞的肝分化

在晚期肝脏疾病中，肝祖细胞（HPC）常被异常激活，但其向肝细胞的分化能力受损。为探究肠上皮细胞及其外泌体对HPC肝分化的影响，在新型肠-肝芯片中建立了Caco-2/HepaRG细胞系和肠道/HPC类器官的共培养系统。将肠道类器官来源的外泌体给予四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠。结果显示，HPC与肠上皮细胞的共培养促进了HPCs的肝分化，该过程由肠上皮细胞来源的外泌体介导。肠道类器官来源的外泌体治疗改善了CCL4诱导的小鼠肝纤维化。在肠上皮细胞的外泌体中鉴定出miR-371-373等miRNA，通过靶向RPS6KA2调节肝分化。这些结果表明，肠上皮细胞来源的外泌体可促进HPC的肝分化。肠道类器官来源的外泌体可能是晚期肝病的一种新型治疗策略。

8                使用肝脏芯片模型评估TMSC-Exo对非酒精性脂肪肝的治疗潜力

摘要

非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）已成为全球范围内日益严重的公共卫生问题。针对NAFLD的有效治疗策略仍亟待开发。肝脏芯片（LC）技术为NAFLD模型构建和药物研发提供了一个创新平台。本研究旨在利用共培养的人肝细胞（HepaRG）与肝星状细胞和内皮细胞构建一种生物仿生型肝脏芯片，以模拟NAFLD，并评估可扩展的端粒酶逆转录酶（hTERT）-永生脐带间充质干细胞来源的外泌体（TMSC-Exo）在治疗NAFLD中的潜在疗效。结果发现，在低胆固醇培养基中培养的细胞比在Transwell系统中培养的细胞具有更好的存活率。NAFLD芯片模型模拟了体内非酒精性脂肪肝的特征，包括细胞内脂质积累以及肝细胞在蛋白质合成、尿素水平、CYP1A2和CYP3A4方面的功能受损。TMSC-Exo和瑞美替罗显著降低了芯片模型的脂质积累。且TMSC-Exo在提高血清白蛋白、尿素、CYP1A2和CYP3A4水平方面表现更优。TMSC-Exo的治疗效果在NAFLD小鼠模型中也得到了证实。蛋白质组学分析发现，NAFLD模型与对照组相比，上调和下调的差异表达蛋白质的前15种主要与脂质代谢、内质网应激和炎症有关。总之，NAFLD芯片模型成功重现了肝脂肪变性和功能障碍的关键病理特征，并利用该模型评估并证明了TMSC-Exo对NAFLD的显著治疗效果。

9                3D生物打印脱细胞脐带基质贴片用于增强TMSC-EVs在糖尿病创面愈合中的递送

摘要

细胞外囊泡因其免疫调节和促血管生成特性，成为糖尿病伤口愈合领域有前景的无细胞治疗方法。然而，确保长期稳定性和实现靶向递送的挑战仍阻碍其临床转化。在此，开发了一种3D生物打印的脱细胞脐带基质贴片（MDUM），能够持续递送永生化脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡（TMSC-EVs）。封装在MDUM中的TMSC-EVs在4°C储存条件下可保持结构完整性和生物功能性超过30天，效果优于封装在明胶甲基丙烯酰水凝胶（GelMA）中的EVs（P ＜ 0.01）。数据表明，在糖尿病小鼠伤口模型中，MDUM能够增强TMSC-EVs的滞留和递送，并通过降低促炎细胞因子水平、增强新血管形成和加速胶原沉积，进一步增强了TMSC-EVs对糖尿病伤口愈合的治疗效果。本研究首次将生物材料工程与永生化细胞来源的细胞外囊泡相结合，为慢性伤口管理中的再生治疗建立了一个可转化的平台。

10                适配体驱动的DNA框架开关通过巨噬细胞募集清除PD-L1阳性EVs

摘要

免疫系统利用分子开关来维持动态稳态，然而恶性细胞常常模仿这些天然开关，最终逃避免疫监视，导致免疫耐受和肿瘤恶化。人们迫切需要能够重新定向免疫信号通路的化学合成开关来逆转这一病理进程，但相关报道甚少。在此，该研究开发了一种合成的DNA框架（DF）开关，可在体内重编程巨噬细胞介导的免疫清除，靶向清除PD-L1+的细胞外囊泡（EVs）。这种合成开关由一个以Man6配体修饰的PD-L1靶向适配体（MJ5C）和一个DNA框架组成——MJ5C-Man6-DF，其作用机制遵循“识别-招募”的顺序。在“关闭状态”下，MJ5C稳定地嵌入DNA框架内，将Man6保留在内部空腔中。然而，当识别到靶标后，MJ5C切换至“开启状态”，与PD-L1+ EVs结合，发生构象变化，使其末端的Man6包被在EVs表面。被Man6包被的EVs随后通过膜受体CD206招募巨噬细胞，从而实现高效的吞噬作用。研究表明，MJ5C-Man6-DF具有卓越的稳定性和特异性，在体内能够将αPD-L1疗法的效果增强90.7%，同时使T细胞活化水平提高55%。因此，这种适配体驱动的DNA框架开关为基于DNA的分子工程领域提供了一种精准免疫重编程的策略。

11                周细胞通过调节肿瘤局部血管张力和血流动力学促进转移

摘要

血液动力学对循环肿瘤细胞的存活和外渗至关重要，但血液动力学对肿瘤细胞内渗的影响仍然未知。本研究发现，与无转移患者相比，结直肠癌肝转移患者原发肿瘤的血管直径和血流量均增加。原发肿瘤中NKX2-3高表达的肿瘤周细胞（TPC）亚群与患者的血行转移相关。机制上，富含长链非编码RNA NEAT1的细胞外囊泡诱导TPC中NKX2-3上调。NKX2-3通过PDE1C/cAMP/PKA信号轴抑制TPC中的钙离子内流，诱导肿瘤血管舒张，并增加血流速度和血管通透性。敲除Nkx2-3或用设计肽药物阻断TPC中NKX2-3的转录活性，可引起肿瘤局部血管收缩，并减少血流量，从而减轻肿瘤转移。这些发现揭示了TPC调控的血管扩张和血液动力学促进了肿瘤转移，并为肿瘤转移提供了潜在的预后标志物和治疗策略。

12                靶向sEVs中的网状素4（RTN4）可抑制转移并增强三阴性乳腺癌的免疫治疗效果

摘要

细胞外小囊泡（sEV）是一类富含异质性内容物的天然囊泡，具有无创检测的巨大优势，这些囊泡还参与复杂的细胞间通讯并介导重要的生物学功能。然而，血浆sEV在三阴性乳腺癌（TNBC）临床预后预测中的潜在价值及其生物学功能尚未完全阐明。本研究从非转移性和转移性TNBC血浆样本中分离sEV，发现转移患者中网状蛋白4（RTN4）的表达显著高于非转移患者。同时，临床数据表明RTN4与预后不良和晚期TNBC相关。体内外实验表明，与RTN4低表达的sEV相比，RTN4高表达sEV显著促进肿瘤细胞迁移、侵袭、上皮间质转化（EMT）和肺转移，并上调肿瘤组织中PD-L1的表达，抑制CD8+T细胞浸润。机制上，sEV中的RTN4通过激活NF-κB信号通路驱动肿瘤EMT和PD-L1表达。抗PD-1和抗RTN4的联合治疗在抑制肿瘤转移、EMT和促进CD8+T细胞浸润方面显著优于单一治疗。本研究揭示了sEV蛋白RTN4在肿瘤进展和免疫系统调节中的分子机制，表明靶向RTN4与抗PD-1联合治疗具有临床潜力。sEV蛋白RTN4是TNBC无创检测的潜在新型预后标志物，也是TNBC治疗的新靶点。

13                恢复心磷脂稳态可通过抑制ATG5介导的神经元自噬依赖性铁死亡来减轻脑缺血再灌注损伤

摘要

心磷脂（CLs）是线粒体特异性磷脂，在神经系统疾病中起着关键作用。然而，它们在脑缺血/再灌注（I/R）损伤中的作用仍尚未被充分研究。本研究通过脑梗死/再灌注（MCAO/R）小鼠模型和氧糖剥夺/再灌氧（OGD/R）体外模型，结合脂质组学分析和荧光染色，发现梗死周围脑组织CL显著减少，且酰基链重塑，抑制EV释放可恢复神经元CL水平。SS-31可抑制CL释放，维持CL含量，从而恢复CL的稳态，主要通过抑制神经元铁死亡来减轻缺血再灌注损伤。从机制上看，SS-31下调了与自噬相关的关键基因ATG5，而激活自噬或过度表达ATG5可逆转SS-31的保护作用。临床研究显示，接受血管内治疗患者的血浆CL水平与其90天功能预后相关。以上研究结果表明，维持CL稳态是一种新型神经保护策略，SS-31通过恢复CL稳态并改善由ATG5介导的自噬依赖性神经元铁死亡，从而减轻缺血再灌注损伤，为中风治疗提供了新的途径。

14                富血小板血浆PRP衍生EVs递送尼拉帕尼用于超声成像和动脉粥样硬化治疗

摘要

动脉粥样硬化中聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）过度激活，因此PARP抑制剂具有潜在的治疗价值，但其体内靶向性差，导致疗效有限。富含血小板的血浆来源细胞外囊泡（PEVs）能够天然靶向炎症部位并减轻氧化应激，为药物递送提供了一个有前景的平台。在此，开发了一种纳米平台NGPPEVs，利用PEVs递送PARP抑制剂尼拉帕利，并进一步包载碳酸氢钙（Ca(HCO₃)₂）以实现细胞内产气，从而将靶向治疗与超声成像能力相结合。体外实验表明，NGPPEVs能显著清除细胞内活性氧（ROS），并抑制与氧化应激和胆固醇代谢相关的通路。机制上，NGPPEVs通过抑制PARP1–IL-6–CD36轴，显著下调关键清道夫受体CD36，从而抑制泡沫细胞形成。在高脂高胆固醇饮食喂养的载脂蛋白E缺陷小鼠模型中，NGPPEVs显示出卓越的治疗效果，能有效减少动脉粥样硬化斑块面积并增强斑块稳定性。总体而言，NGPPEVs在动脉粥样硬化的精准诊断和治疗方面具有巨大潜力。

15                艰难梭菌衍生EVs诱导巨噬细胞的促炎反应

摘要

艰难梭菌是住院和非住院患者中抗生素相关性腹泻的主要原因。本研究通过蛋白组学在艰难梭菌630菌株细胞外囊泡CD630-EVs中鉴定出1064种蛋白质，其中包括四种免疫相关蛋白：FliC、TrxA、TrxA2和HtpG。其中，FliC在免疫相关通路中表现出最高的表达。CD630-EVs刺激小鼠巨噬细胞产生炎症因子。然而，加入鞭毛蛋白受体抑制剂TH1020后，细胞因子的产生被显著抑制。蛋白质对接分析表明，TH1020破坏了TLR5与FliC之间的相互作用，从而减弱了FliC介导的巨噬细胞炎症反应。FliC可能与宿主TLR5相互作用激活先天免疫，从而在介导CD630-EVs诱导的巨噬细胞炎症反应中发挥关键作用，进而可能影响适应性免疫反应。总之，本研究阐明了在艰难梭菌感染过程中，CD630-EVs对宿主巨噬细胞的免疫调节作用，其中FliC是介导巨噬细胞促炎反应的关键介质。研究强调了FliC可能在艰难梭菌感染期间的肠黏膜损伤中发挥重要作用，并作为减轻艰难梭菌感染炎症的潜在治疗靶点。

16                紫花地丁衍生的外泌体样纳米囊泡负载粘合剂通过抗炎特性促进糖尿病骨折愈合

摘要

糖尿病患者骨折的治疗面临着严峻的临床挑战，由于巨噬细胞极化失调和持续性的炎症微环境，常常会导致骨折不愈合或延迟愈合。传统内固定术虽能稳定骨折，但在调节炎症微环境方面的能力有限，从而限制了骨再生。本研究开发了一种负载紫花地丁来源外泌体样纳米囊泡（VDNPs）的生物粘合水凝胶（DPC-3），通过局部免疫调节促进骨折愈合。该水凝胶由聚丙烯酰胺（Pam）、双醛淀粉和30%氧化硫酸软骨素通过Schiff碱反应合成，具有强组织粘附性、机械稳定性和持续释放VDNPs的能力。机制上，VDNPs通过下调NF-κB信号通路促进M2巨噬细胞极化，减轻炎症并促进成骨。在糖尿病股骨骨折模型中，DPC-3/VDNPs水凝胶与传统治疗相比，显著加速了骨再生，体现在骨矿物质密度、体积分数和骨小梁厚度的增加上，同时组织学分析也表明骨生成和胶原蛋白沉积有所增加。总体而言，突显了DPC-3/VDNPs水凝胶作为一种有前景的治疗策略的潜力，通过将机械支撑与天然来源生物活性相结合，有望改善糖尿病骨折愈合效果。

17                热应激通过EVs介导的潜在瘤胃-乳腺通信抑制泌乳：微生物组、代谢组和miRNA谱的综合分析

摘要

热应激给奶牛生产带来了显著的生理和经济挑战，然而尚不清楚瘤胃微生物失调、宿主代谢紊乱和泌乳抑制之间的整合机制。本研究旨在利用综合多组学方法，阐明热应激如何通过潜在的、由细胞外囊泡介导的瘤胃-乳腺通讯轴来抑制泌乳。结果显示，暴露于热应激下的奶牛直肠温度和呼吸频率升高，产奶量、乳脂率和乳蛋白率显著下降。同时瘤胃发酵功能明显受损，促炎细胞因子水平升高及屏障功能障碍表明发生了全身性炎症。宏基因组分析显示，热应激重塑了瘤胃微生物组，显著降低了普雷沃氏菌属、双歧杆菌属和乳杆菌属的相对丰度，同时富集了产甲烷菌和低效率发酵菌群。在功能上，热应激增强了微生物的甲烷代谢途径，并抑制了碳水化合物降解通路，从而减少了宿主用于乳合成的能量供应。瘤胃液代谢组学分析支持这一转变，其中特定的代谢物与泌乳性能显著相关。值得注意的是，在热应激条件下，血浆和牛奶来源的细胞外囊泡miRNA均表现出显著表达变化，主要靶向与应激和免疫反应、激素调节以及乳腺发育和功能相关的信号通路。研究表明，热应激通过瘤胃微生物组、代谢稳态以及细胞外囊泡miRNA信号的多层次改变来抑制泌乳，这共同支持了“瘤胃-乳腺通讯轴”的存在。这些发现为理解热应激反应的发病机制提供了新的见解。

三、ExosupurⓇ外泌体纯化袖珍柱引用文章

收录 1  篇文章  |  最高IF: 23.6

1                脐带血自然杀伤细胞外泌体通过ITGB2-穿孔素介导的包膜破坏在体外和体内抑制寨卡病毒的感染性

摘要

寨卡病毒能够穿越胎盘屏障，导致胎儿小头畸形和先天性寨卡综合征。病毒的E蛋白介导了其与宿主细胞的相互作用及感染过程。本研究中发现脐带血自然杀伤细胞来源的细胞外囊泡（CBNK-EVs）在体外能有效抑制寨卡病毒感染，且不影响细胞活力。机制上讲，CBNK-EVs通过其表面富集的整合素ITGB2与病毒E蛋白相互作用，从而与寨卡病毒结合，促进纳米级囊泡与病毒颗粒的接触或膜融合。这种相互作用通过细胞外囊泡内的穿孔素触发抗病毒活性，导致病毒感染性降低。值得注意的是，CBNK-EVs不仅能有效穿越胎盘屏障，保护胎儿免受寨卡病毒引起的病理损伤，还能在干扰素缺陷的小鼠模型中降低寨卡病毒载量，并减少先天性寨卡综合征的发生率和死亡率。此外，使用单克隆抗体阻断ITGB2或用EGTA螯合Ca²+，均会削弱CBNK-EVs的抗寨卡病毒活性。综上所述，研究结果表明，CBNK-EVs作为天然抗病毒纳米颗粒，在抑制寨卡病毒感染及垂直传播中发挥关键作用，为治疗与寨卡病毒相关的先天性并发症提供了一种有前景的策略。

四、外泌体工程化改造相关产品及试剂盒引用文献

收录 10  篇文章  |  最高IF: 23.6

（ContrExoⓇ外泌体参考品、ExoBroochⓇ脂锚靶向肽试剂盒、ExoLoadⓇ外泌体核酸负载试剂盒）

1                包裹在MXene修饰的GelMA水凝胶中的AntagomiR-192-5p工程外泌体通过靶向OLFM4促进烧伤创面的上皮化

摘要

烧伤创面愈合是一个多因素过程，常因过度炎症反应和角质形成细胞功能受损而复杂化，两者均是导致愈合延迟的关键因素。本研究通过高通量测序筛选了氧化应激条件下调控上皮化过程的关键miRNA。数据显示，miR-192-5p在角质形成细胞氧化应激模型和烧伤创面组织中均显著上调，对角质形成细胞的增殖、迁移和凋亡产生不利影响。抑制miR-192-5p可通过上调OLFM4（一种与细胞增殖、粘附和迁移相关的关键基因）增强表皮细胞功能。为优化递送和治疗效果，将负载antagomiR-192-5p的间充质干细胞来源外泌体包封在由GelMA和MXene（Ti3C2Tx）纳米片组成的复合水凝胶中，形成多功能敷料。该敷料实现了ant-192的持续释放，延缓其降解，并发挥抗炎特性，从而促进上皮化和烧伤创面愈合。本研究为烧伤创面愈合提供了一种新的治疗策略。

2                NIR-II工程化外泌体纳米治疗探针用于原位胶质母细胞瘤的“定向爆破”

摘要

胶质母细胞瘤（GBM）是一种高度侵袭性和致死性脑肿瘤，因其预后差且缺乏有效治疗方案而构成严峻的临床挑战。本文报道了一种基于近红外II区（NIR-II）有机分子MYM的光热诊疗平台，该分子兼具强荧光和高效光热/光动力治疗能力。为最大化疗效，将MYM封装在293F细胞来源的外泌体中，并进一步用iRGD肽修饰，以增强肿瘤靶向性和血脑屏障穿透能力，得到MYM@iRGD-Exo。体内研究表明，MYM@iRGD-Exo可有效穿透血脑屏障并选择性靶向GBM细胞。在激光照射下，它显著抑制肿瘤进展，同时促进T细胞浸润以增强免疫应答。全面的RNA测序分析揭示了免疫应答通路的激活，突显了该系统调节抗肿瘤免疫的潜力。本研究通过整合精准靶向递送、多模态成像和协同治疗效应，为胶质母细胞瘤治疗提供了有效策略。

3                NK细胞衍生EVs携带衰老细胞清除剂可消除化疗诱导的衰老性骨肉瘤细胞

摘要

骨肉瘤是一种以高转移风险和治疗后高复发率为特征的骨肿瘤类型。放疗、化疗等传统肿瘤治疗方法诱导的衰老可能导致肿瘤清除不彻底和潜在的复发风险。近年来，化疗药物与衰老细胞清除药物的联合应用已成为改善肿瘤治疗的一种有前景的策略，但该方法在安全性和靶向特异性方面仍面临挑战。为了进一步提高化疗对骨肉瘤的疗效，开发了一种基于工程化自然杀伤细胞来源的细胞外囊泡的衰老细胞清除药物递送系统iRGD-EVs-Dox，该系统能够靶向骨肉瘤细胞。通过将多柔比星装载到工程化细胞外囊泡中，用于诱导骨肉瘤细胞发生细胞衰老；然后递送Bcl-2家族抑制剂ABT-263负载的工程化细胞外囊泡iRGD-EVs-ABT-263，以特异性清除由多柔比星诱导的衰老骨肉瘤细胞。研究结果表明，iRGD-EVs对骨肉瘤细胞具有高效的靶向能力；在体外实验中，iRGD-EVs-ABT-263能有效诱导多柔比星所致衰老骨肉瘤细胞的衰老清除；在骨肉瘤细胞异种移植小鼠模型中，该策略能够抑制肿瘤生长。综上，研究证明了利用工程化NK细胞来源的细胞外囊泡，先递送化疗药物诱导骨肉瘤细胞衰老，再递送衰老细胞清除药物消除化疗诱导的衰老骨肉瘤细胞这一治疗策略的有效性，为更高效的癌症治疗提供了一种新思路。

4                工程化纳米囊泡平台同时触发YAP依赖性铁死亡和黑色素瘤微环境递送miR-150-3p重新编程T细胞免疫

摘要

黑色素瘤仍是一种高度侵袭性的恶性肿瘤，疗效有限且常对免疫检查点阻断产生耐药。miR-150-3p在黑色素瘤来源EV中升高，ANXA2被鉴定为选择性促进其装载进入EV的关键RNA结合蛋白。因此，本研究通过共表达miR-150-3p和ANXA2于HEK293T细胞，经肿瘤靶向iRGD肽表面修饰，构建工程化EV——iEV-150。结果发现，iEV-150在体内表现出增强的黑色素瘤细胞摄取和肿瘤特异性积累。机制上，iEV-150抑制NF2表达，破坏NF2-LATS1相互作用，激活YAP信号，进而上调铁死亡相关基因ACSL4和CHAC1，通过NF2-Hippo-YAP轴诱导铁死亡。此外，iEV-150促进肿瘤微环境中CD8+T细胞浸润和活化，显著增强了ICB在黑色素瘤模型中的治疗效果。综上，iEV-150整合了ANXA2介导的miRNA装载、肿瘤特异性靶向、铁死亡诱导和免疫微环境重编程，为克服黑色素瘤ICB耐药提供了有效的RNA治疗平台。

5                CAP-CD56+CD271+BMSCs负载的PVA/SA缓释水凝胶减轻软骨细胞衰老改善腰椎小关节骨性关节炎

摘要

通过单细胞RNA测序，发现与常规BMSCs相比，CD56+CD271+ BMSC亚群及其来源的外泌体显示出显著增强的促软骨形成和抗衰老能力。随后将其分离出来，并从该特定亚群中提取外泌体，用软骨细胞特异性抗原肽（CAP）进行工程化修饰，制备CAP-CD56+CD271+BMSCs Exos。进一步开发了聚乙烯醇（PVA）/海藻酸钠（SA）复合水凝胶作为这些靶向外泌体的缓释载体。研究发现，CAP修饰显著提高了体内对软骨细胞的靶向效率，而PVA/SA水凝胶实现了外泌体的持续释放，延长了其在损伤部位的滞留时间。CAP-Exos-PVA/SA系统可显著改善骨关节炎的软骨结构，增加基质沉积，并抑制基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及衰老标志物（p16/p21/p53）的表达。机制研究表明，外泌体介导的miR-210-3p递送可抑制软骨细胞中HIF-3α的表达。当阻断miR-210-3p或过表达HIF-3α时，这些治疗效果均被消除。结论：CAP-CD56⁺CD271⁺ BMSCs Exos-PVA/SA水凝胶缓释系统为腰椎小关节骨性关节炎提供了一种有前景且有效的治疗方法。

6                针对内皮细胞靶向修饰的人参外泌体递送IL-6 SiRNA改善肝脏缺血再灌注损伤

摘要

肝脏缺血再灌注损伤是肝切除术后肝衰竭及肝移植后移植物功能障碍的关键病理基础。过度的炎症反应、氧化应激和细胞死亡是IRI的核心机制，但由于缺乏多靶点治疗方案，目前临床对IRI的管理仍不充分。本研究开发了以内皮靶向肽VHP修饰的人参来源外泌体，并装载IL-6 siRNA（Si-IL6），得到siRNA@VG-Exos，用于减轻肝脏IRI。VHP修饰促进了siRNA@VG-Exos向受损内皮细胞的靶向递送，增强了其在IRI部位的聚集和后续释放。siRNA@VG-Exos有效减少了肝脏炎症因子的释放，提高了T-SOD和CAT的表达，同时抑制了MDA的生成，从而减轻了氧化应激。此外，它们促进了线粒体膜电位的恢复，维持了线粒体稳态。Si-IL6还抑制了肝组织中IL-6的表达，协同增强了G-Exos的抗炎作用。更重要的是，siRNA@VG-Exos抑制了肝巨噬细胞中CD86的表达，并促进了CD206的表达，从而推动巨噬细胞从促炎的M1表型向抗炎的M2表型极化，调节免疫反应。最终，siRNA@VG-Exos减少了肝脏坏死面积，降低了ALT和AST水平，恢复了肝组织功能。进一步的测序分析表明，siRNA@VG-Exos通过抑制免疫炎症反应和氧化应激损伤来减轻肝脏IRI。因此，siRNA@VG-Exos为治疗肝脏IRI提供了一种新型靶向策略。

7                ADAR1调节巨噬细胞外泌体改善脓毒性心肌病心肌损伤的治疗潜力

摘要

脓毒症心肌病（Sepsis-induced cardiomyopathy, SICM）是一种危重的心血管并发症，以心功能不全和高死亡率为特征。目前，SICM的分子机制尚不明确，且缺乏有效的治疗手段。本研究发现，RNA腺苷脱氨酶1（ADAR1）在调控巨噬细胞极化及外泌体介导的细胞间通讯中发挥关键作用，从而减轻SICM的心肌损伤。在脓毒症小鼠模型中，巨噬细胞中ADAR1的过表达可促进抗炎型M2表型转化，减轻心肌炎症，并抑制心肌细胞凋亡。机制上，ADAR1调控巨噬细胞来源外泌体中miR-122的水平，而外泌体miR-122靶向X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP），进而调节心肌细胞的存活。最终，揭示了巨噬细胞外泌体中ADAR1-miR-122-XIAP信号轴在对抗脓毒症心肌损伤中的保护作用，为SICM提供了潜在的疾病调控策略。

8                基于机器学习的糖酵解亚型分类和外泌体介导的PKM剪接调控克服高糖酵解髓系白血病中的药物耐药性

摘要

本研究全面探讨了糖酵解在急性髓系白血病（AML）发病机制中的作用。糖酵解水平升高与不良预后显著相关，生物信息学分析鉴定出HIF1A和MIF为关键调控因子，并揭示了两种与恶性细胞比例增加、致癌通路激活、基因组不稳定性及较差生存相关的分子亚型：高糖酵解亚型（C1）低糖酵解亚型（C2）。这些亚型表现出不同的药物敏感性，并可预测免疫治疗反应。利用CoxBoost和StepCox算法优化开发了一个9基因预后特征，其在不同队列中均显示出准确的生存预测能力。关键的是，异常的PKM2过表达与伊马替尼耐药相关。靶向PKM外显子9-10剪接接头的vivo-morpholino反义寡聚物（vMO）能有效将PKM剪接从PKM2转变为PKM1，在体外和体内抑制白血病生长并逆转伊马替尼耐药。为减轻vMO的毒性，开发了IL3-Lamp2b工程化的外泌体，该外泌体能够高效装载vMO，实现向白血病细胞的靶向递送，强效纠正PKM剪接，显著逆转伊马替尼耐药，且对基质细胞毒性极小。这项工作定义了基于糖酵解的AML亚型及其治疗意义，并确立了工程化外泌体递送的vMO作为克服高糖酵解髓系白血病耐药的一种有前景的策略。

9                工程化CAR-T衍生外泌体共递送miR-145和细胞毒性蛋白用于靶向实体瘤治疗

摘要

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法在血液系统恶性肿瘤中已显示出卓越疗效，但由于实体瘤中肿瘤穿透受限、免疫抑制微环境以及细胞因子释放综合征（CRS）的风险，其在实体瘤中的应用仍受到限制。在此，通过对靶向B7-H3的CAR-T细胞来源的外泌体进行工程化改造，并装载miR-145，得到Exo-CT-145，开发了一种具有生物活性的无细胞治疗平台。这些外泌体保留了CAR特异性的表面标志物和细胞毒性有效载荷（穿孔素和颗粒酶）。miR-145在多种肿瘤中表达水平较低，可通过多种途径抑制肿瘤的发生和发展。Exo-CT-145在体外显著抑制了食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞的增殖、迁移及上皮-间充质转化（EMT），并诱导细胞凋亡。在体内，Exo-CT-145实现了肿瘤靶向性积累，激活caspase-3，逆转EMT，抑制血管生成，重塑肿瘤微环境，同时未检测到明显的细胞因子释放综合征或全身毒性。本研究提出了一种协同性纳米治疗新范式，整合了抗原特异性杀伤与基因调控调节作用，为实体瘤治疗提供了一个具有改善安全性和有效性的有前景的方向。

10                从临床外泌体分析到工程治疗：富含miR-21-5p的外泌体通过YAP1途径逆转薄子宫内膜

摘要

薄型子宫内膜（TE）与妊娠率降低及不良产科结局相关。尽管当前的干预措施（包括宫腔粘连松解术和激素治疗方案）提供了部分解决方案，但由于TE的发病机制尚不明确，功能恢复仍面临挑战。本研究系统解析了TE患者与健康女性子宫液来源外泌体（UF-Exo）中的miRNA图谱，发现TE来源的UF-Exo中miR-21-5p（和miR-548aa显著降低，这是疾病进展的关键驱动因素。基于这些发现，利用工程化的人脐带间充质干细胞来源外泌体（hUCMSCs-Exo）建立了miRNA重编程治疗策略，该外泌体能够精确协调子宫内膜细胞增殖和血管生成过程。通过精细的生物信息学分析，鉴定出YAP1是miR-21-5p的主要下游靶点。在TE小鼠模型中，富含miR-21-5p的hUCMSCs-Exo成功重编程miR-21-5p/YAP1信号轴，带来了显著的再生效果：子宫内膜厚度增加了4.4倍，纤维化显著抑制，血管化程度提高了33.6倍。该平台同时提高了子宫内膜容受性（αvβ3 mRNA上调233.3%）并重新校准了炎症微环境。本研究发现了新的诊断生物标志物，并开创了创新的治疗方法，从而为改善TE的临床管理提供了潜在策略。