第 01 类血液与淋巴原稿 P6、7、8
血液样本
先判断血浆或血清,再按对应双离心流程处理
2选处理路径不同状态不能混用步骤
3选检测项目立即查看对应送样量
当前项目建议送样量2ml
采集 / 盛放容器推荐:紫帽 EDTA 抗凝管
处理流程3 个关键动作
保存与运输处理后 -80℃ 保存;干冰运输
PROCESS
3 步照着做:血浆
- 1
请用 EDTA 抗凝管采集患者血液;若不能第一时间处理,请于 4℃ 临时保存(建议不超过 4 h,以免溶血)。
- 2
将采集到的血液在 4℃ 下 1500 g 离心 20 min,去除血液中的细胞。
- 3
取上清,4℃ 3000 g 离心 15 min,收集上清(血浆),-80℃ 保存,干冰运输。
寄出前必须看
- 请务必注意无菌操作。
- 请排除溶血/血脂含量丰富的样本,可能导致外泌体分离不纯。
- 请勿使用含肝素抗凝剂的采样管(绿头管)收集盛放;肝素对 PCR 扩增(影响文库构建或 qPCR 检测)有很强抑制作用,且在后面的提取过程很难去除。
- 请排除结核杆菌/HIV 等病原菌/病毒感染样本。
- 请注意勿反复冻融,可能会导致外泌体提取得率和提取 RNA 质量偏低等风险。
特殊情况 / 为什么
- 抽血困难,采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等发生溶血。
- 注射器和针头连接不紧,采血时空气进入,或患者(动物)紧张导致血流不畅,抽血时间过长,都会导致血标本中混有泡沫;这种混有泡沫的血标本放置一定时间后泡沫破裂或迅速干燥,造成血细胞破坏而溶血。
- 全血标本在运输过程中(或离心前处理前)过度振荡或储存不当。
- 不合格的塑料制品会因聚合不完全而具有毒性,这种毒性可造成溶血。
- 患者有溶血性疾病,红细胞有先天或获得性缺陷而易破坏溶血。
- 抽血消毒时,酒精未干就进行抽血。
- 操作过程中,可能引入的动物毛发,而导致溶血。
- 尽量不要收集注射器推到最后的血,也不要使劲挤压注射器。
- 原稿溶血比色卡(% RBCs v/v):不可用 2.0、1.0、0.5、0.25、0.125、0.063;可用 0.031、0.016、0.008、0.004、0.002、0.0。
- 溶血色卡仅作视觉参考;最终是否接收以技术确认与质检为准。