ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒
概述 ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。
核心信息
- 外泌体工程化改造
- Products
- 概述 ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。
Overview
概述
ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。 首先通过室温生物正交反应在外泌体表面添加活性基团,再通过活性基团与叠氮键(N3)的反应,将与叠氮偶联的小分子/多肽/核酸等有效成分共价结合到外泌体外表面,实现外泌体的表面修饰。叠氮偶联的有效成分合成比较方便,无电性、分子类型等限制,合成后使用本试剂盒即可连接在外泌体表面。 本偶联试剂盒操作便捷,仅需2步共孵育和2步纯化操作,外泌体表面装载效率高可媲美脂锚共孵育,但非特异性吸附更低。
规格
产品名称 | 货号 | 规格 | 用途: ExoCoupl® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒 | EC-01-02 | 6T | 可进行6次正交偶联反应,可处理500μl*6=3ml外泌体(建议外泌体浓度建议高于1E+11 particles/ml或0.5-1μg/μl)
概述
ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。 首先通过室温生物正交反应在外泌体表面添加活性基团,再通过活性基团与叠氮键(N3)的反应,将与叠氮偶联的小分子/多肽/核酸等有效成分共价结合到外泌体外表面,实现外泌体的表面修饰。叠氮偶联的有效成分合成比较方便,无电性、分子类型等限制,合成后使用本试剂盒即可连接在外泌体表面。 本偶联试剂盒操作便捷,仅需2步共孵育和2步纯化操作,外泌体表面装载效率高可媲美脂锚共孵育,但非特异性吸附更低。
规格
应用
1 、治疗性小分子、小核酸、多肽等有效成分的外泌体装载; 2 、提高外泌体靶向性的靶向肽表面装载,比如脑神经靶向肽RVG、缺血心肌靶向肽IMTP、泛癌或炎性细胞靶向肽iRGD等。
优势
1 、 操作便捷,仅需2步共孵育和2步纯化操作,即可完成外泌体表面装载 ; 2 、 外泌体表面装载效率高,比如对于靶向肽外泌体表面装载,本试剂盒装载阳性率可媲美脂锚共孵育 。 3、本试剂盒采用2步法标记的方式,负载目的分子 非特异性吸附更低,背景噪音更低。 4、本试剂盒不限制负载的目的分子种类,用户自备的N3标记的小分子、多肽、核酸均可以,且合成便捷,当然目的分子小于4KD负载效率更高,为了方便测定载量建议同时带上N3和FITC/FAM等荧光基团。
产品性能
首先合成N3和FITC标记的 脑神经靶向肽 RVG( FITC-RVG-K-N3 ),使用本正交偶联试剂盒(Cat#EC-01-01)对恩泽康泰货架产品293F外泌体(Cat#CTE-06)按照说明书处理,以将RVG靶向肽修饰在外泌体表面。同时,另取一份用 293F外泌体(Cat#CTE-06),使用 RVG脂锚靶向肽( Cat#EA-06-1 )将携带FAM荧光的RVG靶向肽同样展示在外泌体表面。 1、负载率对比:通过NanoFCM检测RVG多肽负载阳性率(负载上RVG的外泌体颗粒数/所有外泌体颗粒数)。 如下图所示,结果显示:1)2种方法均可将RVG多肽修饰到外泌体表面,且负载阳性率相当;2)正交偶联试剂盒负载时本底信号更低。 2、将上述2种方法得到的RVG修饰的293F外泌体,脂锚方法得到外泌体命名为“脂锚RVG-外泌体”,正交偶联方法得到外泌体命名为“偶联RVG-外泌体”,未进行RVG修饰的外泌体命名为“对照293F外泌体”,将上述3组外泌体进行红色荧光标记后,分别处理小鼠脑神经瘤细胞Neuro2a细胞和前列腺癌细胞,细胞流式检测细胞对外泌体摄取率。 结果显示:2种方法得到的表面修饰有脑神经元靶向肽RVG的外泌体均可提升 Neuro2a细胞对外泌体的摄取效率;而另外一组不表达RVG受体蛋白的前列腺癌细胞对照,则没有显示出摄取率差异。 注: 1.避免反复冻融。 2.非产品质量问题,不接受退换货。 3.验证数据仅供参考,不作为交付标准。 4. 用户需要自行合成带荧光基团且叠氮键偶联的药物分子,若合成有困难可以联系技术支持为您推荐合成供应商; 5. 建议目的分子的分子量MW不大于4 kD,以得到最佳的偶联效果。若分子量较大,可以在实验步骤5中适当增加投量,初始建议的投量计算方式为MW*10/4000 μl (N3-目的分子-FITC的浓度为1 mg/ml)。 6. 袖珍柱最大上样体积不超过600 μl。 7. 液体溶液使用前请震荡混匀,操作时注意避光。 8. 保质期:1年。
常见问题
1、 使用多功能酶标仪检测荧光后,如何计算载量? 将合成的已知浓度(1 000 μ g/ml ) 的N3 -目的分子-FITC溶液作为标准品,取20μl加入180μl 通用缓冲液稀释10倍为100μg/ml,而后依次取100μl加入100μl通用缓冲液中,经2倍倍比稀释为7个浓度梯度标准品各自混匀;外泌体终产物样本使用通用缓冲液稀释约 2-10 倍至 100μl混匀;各浓度标准品和样本均取 80μl 加至 96 孔板,用多功能酶标仪检测荧光强度(激发光 488nm,发射光 515nm-535nm)。 u 根据标准品的酶标仪检测荧光值和相应浓度(μg/ml),得到标准曲线:y=Ax+D u 稀释的外泌体终产物酶标仪检测荧光值:B(EU) u 外泌体终产物稀释倍数:n u N3 - 目的分子-FITC的 分子量:M(Da) u 外泌体终产物总量:BCA 检测浓度为C(μg/ml) 那么,单位外泌体脂锚靶向肽总载量(nmol/mg)=[(B-D)/A] *n/M/C*1000000 2、 负载后的外泌体如何保存? 为获得最佳结果建议尽可能使用新鲜样本,但由于实验条件的限制,可能无法每次都能使用新鲜样本。为保证阳性颗粒占比建议4℃放置3天内,最多不能超过7天,-20℃放置2周内,样本尽可能避免反复冻融(冷冻前可适量分装)。
说明书下载
引用文献
ExoCoupl ® 试剂盒引用文献: Lin H, Yin L, Liu W, et al. Muscle-Derived Small Extracellular Vesicles Mediate Exercise-Induced Cognitive Protection in Chronic Cerebral Hypoperfusion. Adv Sci (Weinh) . Published online April 24, 2025. doi:10.1002/advs.202410209 IF14.1 1区 文献下载链接: https://advanced.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202410209 用途:使用恩泽康泰ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,将试剂盒中包含的N3-FITC对照品按照操作说明修饰到外泌体表面,以对外泌体进行FITC荧光标记修饰。而后静脉注射获取组织,切片后对外泌体进行Ex Vivo示踪。 结果:Fluorescein Isothiocyanate (FITC)+ sEVs can also be detected in the hippocampus (Figure S2C, Supporting Information).
Documents
ExoCoupl EC-01-02 EVs表面修饰生物正交偶联试剂盒说明书.pdf
常见问题
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 是什么?
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 是外泌体工程化改造分类下的外泌体科研试剂。概述 ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 主要用于哪些实验场景?
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 适用于ExoCoupl ® 外泌体表面修饰生物正交偶联试剂盒,是恩泽康泰开发的基于生物正交反应实现外泌体表面修饰的试剂盒。首先通过室温生物正交反应在外泌体表面添加活性基团,再通过活性基团与叠氮键(N3)的反应,将与叠氮偶联的小分子/多肽/核酸等有效成分共价结合到外泌体外表面,实现外泌体的表面修饰。叠氮偶联的有效成分合成比较方便,无电性、分子类型等限制,合成后使用本试剂盒即可连接在外泌体表面。
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 所属的产品分类是什么?
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 属于「外泌体工程化改造」栏目,可与该栏目下其他外泌体试剂一起用于外泌体培养、分离纯化、工程化改造、检测鉴定或示踪研究流程。
- ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 是否有规格或资料文件?
- 当前页面提供 ExoCoupl EC-01-02 EVs表面修饰生物正交偶联试剂盒说明书.pdf 等资料文件;具体规格建议以页面和正式资料为准。
- 使用 ExoCoupl ® 外泌体表面修饰正交偶联试剂盒 前需要确认哪些信息?
- 建议确认样本类型、实验目的、起始体积或颗粒浓度、下游检测方法以及是否需要配套纯化、表征或示踪流程。