外泌体基础表征

产品介绍 外泌体/EV基础表征,包括EV形态学、粒径分布、总颗粒水平、总蛋白水平、多蛋白标志物及理化性质等正交方法联合检测,以确认样品中EV的存在、数量特征。多维联合表征符合MISEV2023关于“需使用互补技术确认EV存在并评估非囊泡共分离物”的基本要求,有助于提高EV样品的可靠性、可重复性及研究结论的规范性。

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  • 外泌体质量分析检测
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Overview

产品介绍

外泌体/EV基础表征,包括EV形态学、粒径分布、总颗粒水平、总蛋白水平、多蛋白标志物及理化性质等正交方法联合检测,以确认样品中EV的存在、数量特征。多维联合表征符合MISEV2023关于“需使用互补技术确认EV存在并评估非囊泡共分离物”的基本要求,有助于提高EV样品的可靠性、可重复性及研究结论的规范性。

透射电镜TEM

检测仪器: 透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),型号:H-7650(Hitachi ,日立) 检测原理: 透射电镜借助由电子枪发射出来的电子束在真空通道中形成光斑,照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息,样品内致密处透过的电子量少,稀疏处透过的电子量多;经过物镜的会聚调焦和初级放大后的电子影像投射在观察室内的荧光屏板上;荧光屏将电子影像转化为可见光影像以供观察。可以直接观察外泌体的大小与结构。

产品介绍

外泌体/EV基础表征,包括EV形态学、粒径分布、总颗粒水平、总蛋白水平、多蛋白标志物及理化性质等正交方法联合检测,以确认样品中EV的存在、数量特征。多维联合表征符合MISEV2023关于“需使用互补技术确认EV存在并评估非囊泡共分离物”的基本要求,有助于提高EV样品的可靠性、可重复性及研究结论的规范性。

透射电镜TEM

检测仪器: 透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),型号:H-7650(Hitachi ,日立) 检测原理: 透射电镜借助由电子枪发射出来的电子束在真空通道中形成光斑,照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息,样品内致密处透过的电子量少,稀疏处透过的电子量多;经过物镜的会聚调焦和初级放大后的电子影像投射在观察室内的荧光屏板上;荧光屏将电子影像转化为可见光影像以供观察。可以直接观察外泌体的大小与结构。

EV蛋白标志物WB检测

检测说明: 根据MISEV2023建议,至少需要评估1种EV膜上和腔内特征蛋白,以及阴性/污染蛋白,即延续MISEV2014版中“3阳1阴”的建议。 检测原理: Western Blot,通过抗体对凝胶电泳处理过的外泌体样本进行特异性结合,并通过HRP标记的二抗级联放大检测信号,经过底物化学发光试剂(如ECL)发光以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。通过分析条带的位置和深度获得特定蛋白质的表达情况信息。CD63/CD9/CD81/Alix/TSG101/HSP70等为外泌体的阳性蛋白标志物,Calnexin/为外泌体阴性蛋白标志物。

总蛋白含量 - BCA检测

检测说明: BCA蛋白定量法属于《中国药典》通则0731收载的蛋白质含量测定方法之一(BCA法属于其中的比色法类别之一),具有灵敏度较高、重复性良好、对常见缓冲体系及部分表面活性剂耐受性较好的特点,适用于外泌体等低蛋白含量生物样品的总蛋白定量分析。本检测项默认进行3次重复检测。 检测原理: 二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度检测是根据吸光值可以推算出蛋白浓度。碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应,两分子BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值,与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

粒径分布及颗粒浓度- NanoFCM检测

检测仪器: N30E型纳米流式检测仪 检测原理: 纳米流式检测仪可以在单颗粒水平对细胞外囊泡进行无标记的逐一分析。 使用二氧化硅纳米颗粒作为粒径测量的标准品,利用一系列粒径已知(经TEM 表征)的二氧化硅纳米颗粒的混合物,建立散射光强度与颗粒粒径的标准工作曲线,即可将同等采样条件下细胞外囊泡的散射光强度转换为颗粒粒径。 通过检测特定时间内已标定浓度的荧光微球的个数,快速得到特定进样压力下样品流的体积流量,即可得到在相同进样压力条件下待测样品的颗粒浓度。

粒径分布及颗粒浓度-RPS检测

检验仪器: NanoCoulter G 纳米库尔特粒度仪 检测原理: RPS通常指电阻脉冲传感技术(Resistive Pulse Sensing,RPS),也被称为 “库尔特计数原理(Coulter Principle)” 的延伸技术,核心是通过颗粒通过微孔时产生的电阻脉冲信号来分析粒径大小与数量,常用于外泌体表征。 RPS使用纳米微加工工艺,制备出纳米孔微传感芯片,结合微小电流的检测技术(pA 级),将纳米颗粒的检测粒径下推到 50nm,实现单颗粒的精确检测,检测范围 50nm-200nm范围。 详细原理:在固态纳米孔两侧充满电解质溶液,在两端连接正负电极形成电通路并施加电压形成恒电流通路,当有电流通过时,在小孔两侧附近产生相应的“电敏感区”,颗粒通过小孔会置换出相应体积的电解质溶液,导致通路的电阻变化,形成相应的电阻脉冲,脉冲的高度与颗粒大小成正比,单位时间内的脉冲数与样本颗粒浓度成正比。

粒径分布及颗粒浓度-NTA检测

检测仪器: ZetaView® Nanoparticle Tracking Analyzers,型号PMX120 检测原理: ZetaView 采用激光光源照射纳米颗粒悬浮液,并对纳米颗粒的散射光进行检测,通过统计散射颗粒的数量来计算纳米颗粒浓度。同时,追踪纳米颗粒布朗运动的轨迹(NTA),进而计算出单位时间间隔下纳米颗粒的均方位移(MSD),并根据NTA结果得出纳米颗粒粒径分布图。 测量范围:0.01-1μm(直径)。

粒径分布检测-DLS

检测仪器: 纳米颗粒分析仪,HORIBA SZ-100 V2。 检测原理: 激光束穿过颗粒样品,颗粒的布朗运动引起散射光强的波动,利用动态光散射技术检测粒子的散射光强随时间的波动性行为,由于布朗运动的激烈程度与粒径大小显著相关,从而可以建立粒径与散射光强度波动的关系, 并通过Stokes-Einstein方程得到颗粒的粒径信息。 检测粒径范围:0-10μm(直径)

常见问题

外泌体基础表征 是什么服务?
外泌体基础表征 是「外泌体质量分析检测」栏目下的外泌体技术服务。产品介绍 外泌体/EV基础表征,包括EV形态学、粒径分布、总颗粒水平、总蛋白水平、多蛋白标志物及理化性质等正交方法联合检测,以确认样品中EV的存在、数量特征。多维联合表征符合MISEV2023关于“需使用互补技术确认EV存在并评估非囊泡共分离物”的基本要求,有助于提高EV样品的可靠性、可重复性及研究结论的规范性。
外泌体基础表征 适合哪些研究需求?
外泌体基础表征 可支持的研究需求包括:产品介绍;外泌体/EV基础表征,包括EV形态学、粒径分布、总颗粒水平、总蛋白水平、多蛋白标志物及理化性质等正交方法联合检测,以确认样品中EV的存在、数量特征。多维联合表征符合MISEV2023关于“需使用互补技术确认EV存在并评估非囊泡共分离物”的…;透射电镜TEM。
外泌体基础表征 的服务流程或内容包括哪些?
当前页面围绕 产品介绍、透射电镜TEM、EV蛋白标志物WB检测、总蛋白含量 - BCA检测、粒径分布及颗粒浓度- NanoFCM检测 等模块展开说明。
外泌体基础表征 可以交付哪些结果?
交付内容通常围绕检测结果、分析数据、图表或项目报告展开,具体交付格式和深度需根据服务方案、样本情况和项目目标确认。
如何咨询 外泌体基础表征?
可通过官网联系恩泽康泰,提供样本类型、研究目的、预期检测项目和时间要求后,进一步确认外泌体基础表征的服务方案。