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首页 > 外泌体产品试剂 > ExoCCM® 无外泌体血清
无外泌体血清--解决不耐受无血清培养的细胞系外泌体研究难题

胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂,52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。采用常规FBS进行细胞培养时,EV群体中将引入外源FBS来源EV和其他纳米粒子(如蛋白质/生长因子聚集体、核酸),污染细胞来源的EV,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性。因此,恩泽康泰ExoCCM® 无外泌体血清—重磅上线,致力于解决不耐受无血清培养的细胞系外泌体研究难题。

概述

1)为什么使用无外泌体血清?

胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂,52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。


FBS中富含有胎牛来源的细胞外囊泡EVs,其含量远高于细胞所释放的EVs。如果用常规FBS添加到培养基中,在EVs分离后,将得到包含来自培养细胞和添加了FBS条件培养基CCM来源的EV(以及可能的其他纳米粒子)的混合物,且FBS来源的EVs盖过了细胞来源EVs,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性和可靠性。

2)无外泌体血清真的完全没有外泌体吗?

您可能会好奇FBS中到底有多少EVs,去除后大概水平是多少?文献中总结了一下数据,去除前一般FBS中至少含有2*10^10次方数量级的颗粒数,通过18小时超离或者过滤截留等方法,可以去除至少70%以上的颗粒,去除后平均水平约为5*10^10颗粒数。确实是没有办法完全去除外泌体,只能说尽量减少FBS EVs的残留水平。这也提示我们有必要用添加了FBS的培养基提取EVs,作为对照处理细胞进行对比研究。


参考文献:Foetal bovine serum influence on in vitro extracellular vesicle analyses. J Extracell Vesicles. 2021;10(3):e12061.


产品信息

货号
规格产地
保存条件
试用装
EDFBS5050ml新西兰-20℃,有效期5年。4℃保存通常不宜超过1个月。货号EDFBS5,规格5ml



产品优势

本产品经过14项基本质控,确保产品质量:

a.       高安全性:确保内毒素、无菌、无支原体、无牛源病毒等安全性指标合格;


b.      低EVs颗粒残留:


c.       不影响细胞正常生长:



产品使用建议

针对不耐受无血清培养的细胞系,又想开展外泌体研究:


1)直接替代常规FBS使用:

建议将常规完全培养基中的FBS替换为ExoCCMTM无外泌体血清(货号EDFBS50),添加比例保持不变。注意:只替换血清,不要把培养基和其他成分也换了,需要控制变量进行比较。如果换成无外泌体血清后细胞生长较慢,可以适当增加无外泌体血清的添加比例。


2)先用常规FBS再替换无外泌体血清:

对于贴壁细胞汇合密度在70%以上,悬浮细胞培养到最大培养密度的60%-70%,用PBS洗涤细胞2-3遍以去除残留的牛血清FBS,再添加含无外泌体血清(如EDFBS50)的培养基,继续培养24小时或合适时间。(注意:只替换血清,不要直接把培养基和其他成分也换了。

引用文献

1、Dual-Confined engineering boosts Cas12a efficiency for precise single exosome-based breast cancer diagnosis. Chemical Engineering Journal. Volume 517, 1 August 2025, 164318      IF=13.2    1区

下载链接:https://drive.weixin.qq.com/s?k=ADwAeQcoABAuJEzUS0

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