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首页 > 外泌体产品试剂 > Exosupur® 细胞上清2步法快速EV纯化kit
Exosupur® 细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒

Exosupur®细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒,基于自主专利开发(专利号:ZL201811302563.0),可对细胞上清、尿液、脑脊液等成分简单的样本进行快速、大通量外泌体分离纯化,纯化后的外泌体可以直接进行表征相关检测以及细胞学和动物实验。无需超高速离心设备,解决了传统超速离心方法步骤繁琐、依赖于超高速离心机设备、预约困难、耗时费力等难题。

概述

Exosupur®细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒,基于自主专利开发(专利号:ZL201811302563.0),可对细胞上清、尿液、脑脊液等成分简单的样本进行快速、大通量外泌体分离纯化,纯化后的外泌体可以直接进行表征相关检测以及细胞学和动物实验。无需超高速离心设备,解决了传统超速离心方法步骤繁琐、依赖于超高速离心机设备、预约困难、耗时费力等难题。

规格


    产品货号规格应用
    Exosupur®细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒ESSO5050ml对50ml的细胞上清等大体积样本进行快速外泌体分离纯化
    ESSO500500ml对500ml的细胞上清等大体积样本进行快速外泌体分离纯化



应用

    本产品适合无血清培养的细胞上清,以及尿液、脑脊液、羊水等大体积样本,即适合外泌体浓度比较低且成分比较简单的样本类型,进行快速外泌体分离纯化。

    如本身外泌体浓度特别低想提高得率可先在上述处理后,先用100KDa超滤管对上清进行3-5倍浓缩,再进行后续步骤。


优势

1、简单高效:仅需提取、过柱纯化,2步即可完成外泌体分离纯化。

2、得率高,总颗粒数回收率高于60%-70%,蛋白去除率高于98%。



产品性能

    使用ESS050分离的无血清培养的293F细胞上清外泌体,进行电镜观测,结果如上所示。


常见问题

    1、如果细胞上清中添加了胎牛血清,还能使用本产品分离外泌体吗?

    如果细胞上清中添加了高比例胎牛血清,如10% FBS,使用本产品无法有效去除其中富含的脂蛋白等杂质,需要结合超离、排阻色谱(Exosupur® ES9P11e/ES9P14e)等方法进一步除杂。

    使用ESS050分离的含10%常规FBS胎牛血清培养的癌细胞上清外泌体,进行电镜观测,如上所示,血清中杂质较多,因此不建议单独使用本产品进行含血清体系外泌体的分离纯化。

    2、样本如何进行预处理?

    ①收集细胞上清,300g 4℃ 离心10min去除死细胞,3000g 4℃ 离心10min去除细胞碎片,10000g 4℃ 离心10min去除杂质碎片至无明显沉淀,0.22μm微孔滤膜过滤。

    ②尿液充分涡旋1min后,先3000g离心10min去除沉渣上清进行0.22μm微孔滤膜过滤,滤出液浓缩后备用。

    本产品适合无血清培养的细胞上清、尿液、脑脊液、羊水等,外泌体浓度比较低且成分比较简单的样本类型,进行外泌体分离纯化。

    如本身外泌体浓度极低想提高得率可先在上述处理后,先用100KDa超滤管对上清进行3-5倍浓缩,再进行后续步骤。 其他类型样本预处理方法,请参考文献或联系我们。 

    3、  离心机离心力达不到10000g?

    建议离心力可以减少到6000g并4℃离心60min。时间的减少或者离心力的降低对于回收率有一定的影响,可以根据自己样本情况,进行评估。

    4、加入A液和B液混匀后,4℃静置孵育最长多久?

    建议12h起,但不建议超过24h。 

    5、  孵育过夜离心之后无沉淀,这个现象正常吗?

     由于某些细胞上清外泌体含量比较低,加了A液和B液离心之后肉眼无法观察到沉淀,建议:a.离心前根据离心后外泌体所在大致位置进行标记,以便后续弃去上清时减少损失。b.离心后在重悬时使用 PBS仔细吹打离心管壁四周和底部;提取后的外泌体应先进行 NTA/NanoFCM 颗粒浓度或 BCA 蛋白定量检测,再决定是否进行后继实验。


说明书下载

ESSO50-Exosupur®细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒说明书.pdf

ESSO500-Exosupur®细胞上清2步法快速外泌体纯化试剂盒说明书.pdf


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