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外泌体组学研究

Multi-omics Studies of Extracellular Vesicles

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客户自己提的外泌体,准备送电镜,昨天放的4度储存,今天️絮状沉淀,有影响吗?

这些絮状物 是杂质,我们做电镜前会简单低速离心,将絮状物沉淀下去,然后吸取上清制样观察,所以一般不会有太大影响。

BCA检测需要多少外泌体?检测前需不需要先用裂解?

BCA检测需要10μL外泌体,检测前不需要裂解液。BCA蛋白浓度检测原理:碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫色络合物,两分子BCA螯合一个Cu+。检测该水溶性复合物在562nm处的吸收值,与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。BCA检测PH为11左右,一方面NaOH本身具有较强的溶解能力,检测时囊泡不能保持完整状态;另一方面,BCA试剂有效成分都是小分子,有一定的渗透性;所以不用裂解可以直接检测。我们做过裂解和不裂解外泌体检测BCA,差别不明显。

发文章一定要做外泌体表征吗?

是的,就目前外泌体相关文章调研结果来看外泌体表征依然是文章发表不可缺少的部分。外泌体表征主要是证明研究对象是外泌体,而非其他来源的囊泡,是外泌体研究的基础。其中电镜检测和粒径分析是所有文章都会展示的内容;有些样本珍稀、微量或者样本研究比较少尚未有已知的marker蛋白,WB结果可以不展示。

外泌体表征一般做几项检测?

外泌体表征需要做几项检测主要取决于外泌体的应用场景。一般来说科学研究要求比较低,只需要做最常见的TEM,WB和纳米流式即可;但是对工业客户,特别是医药研究,需要检测的内容就比较多,恩泽针对企业端外泌体鉴定需求提供35项检测服务。
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